基因工程的基本操作程式

提取目的基因、目的基因與載體連線、將與目的基因連線的載體匯入受體細胞、:目的基因的表達與檢測。

從基因文庫中獲取目的基因(俗稱:鳥槍法):將含有某種生物的許多DNA片段,匯入受體菌,的群體中儲存,各個受體菌分別含有這種生物不同的基因,稱為基因文庫。當需要某一片段時,根據目的基因的有關資訊,如根據基因的核苷酸序列、基因的功能、基因,在染色體上的位置、基因的轉錄產物mRNA,以及基因的表達產物蛋白質等特性來獲取目的基因。

基因工程的基本操作程式

用DNA連線酶連線具有互補粘性末端的DNA片段;E·coliDNA連線酶,來源於大腸桿菌,可用於連線粘性末端;T4DNA連線酶,來源於T4噬菌體,可用於連線粘性末端和平末端,但連線效率低。

基因工程的基本操作程式

將目的基因匯入受體細胞:將目的基因匯入受體細胞是實施基因工程的第三步。目的基因的片段與運載體在生物體外連線形成重組DNA分子後,下一步是將重組DNA分子引入受體細胞中進行擴增。基因工程中常用的受體細胞有大腸桿菌,枯草桿菌,土壤農桿菌,酵母菌和動植物細胞等。用人工方法使體外重組的DNA分子轉移到受體細胞,主要是借鑑細菌或病毒侵染細胞的途徑。

基因工程的基本操作程式

目的基因的檢測和表達:目的基因匯入受體細胞後,是否可以穩定維持和表達其遺傳特性,只有透過檢測與鑑定才能知道。這是基因工程的第四步工作。

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