產氣莢膜梭菌檢驗注意事項

產氣莢膜梭菌為人類氣性壞疽的主要病原菌。

1892年,美國病理學家W。H。韋爾奇等自一屍體分出本菌,因而又稱魏氏梭菌。菌體較大,大小為(0。9~1。3)×(3。0~9。0)微米,無鞭毛,有莢膜。芽孢橢圓形,位於次級端。厭氧不嚴格。菌落直徑2~5毫米,在血平板上會出現β溶血環,並出現雙溶血帶。糖發酵能力強,產酸產氣。本菌的特徵之一是在牛乳培養基中呈暴烈發酵現象。本菌廣泛存在於土壤、 人和動物的腸道以及動物和人類的糞便中,會散發臭味。

長期以來產氣莢膜梭菌一直僅被認為是一種創傷感染病原菌,直到1943年,才證實它可經過消化道對人產生危害,為食物中毒病原菌。作為重要的病原菌,在食品及水的微生物檢驗標準中均有涉及,如GB 4789。23-2012、GB 8538-2016 ,在微生物實驗室產氣莢膜梭菌檢驗實驗過程中,應注意以下四點:

1、分離本菌採用TSC瓊脂(GB 4789。13-2012),新增樣品並傾注培養基後,需注意在培養基凝固後在表面再傾注一層培養基,使得樣品完全被培養基覆蓋。若產氣莢膜梭菌暴露在外界,則可能導致其菌落不顯黑色。

產氣莢膜梭菌檢驗注意事項

產氣莢膜梭菌ATCC13124

2、進行暴烈牛乳發酵實驗時,含鐵牛乳培養基只煮沸溶解不滅菌的話,能有效提前暴烈發酵的時間。此外,接種菌液時,菌液濃度需較高,並且接種於培養基中下部,不能接種於

培養基

表面;因暴烈發酵時培養基會上升,因此培養及表面到試管口應留一定空隙,防止實驗過程中培養基溢位。

產氣莢膜梭菌檢驗注意事項

圖左為滅菌培養基,右圖為未滅菌培養基

3、乳糖明膠在溫度較高之時呈現液態,此時接種接種FTG培養物至乳糖明膠生化管當中即可。記得是在培養結束後將乳糖明膠放置4度1小時,再觀察培養基的液化情況,而不是在培養基結束後立刻觀察。

產氣莢膜梭菌檢驗注意事項

4、緩衝動力硝酸鹽實驗,滴加硝酸鹽試劑甲、乙液以檢查亞硝酸鹽的存在。15 min 內出現紅色者,表明硝酸鹽被還原為亞硝酸鹽;如果不出現顏色變化,則加少許鋅粉,放置10 min,出現紅色者,表明該菌株不能還原硝酸鹽。如果沒有出現顏色,說明原菌已經將硝酸鹽還原至氮氣甚至銨鹽。

產氣莢膜梭菌檢驗注意事項

產氣莢膜梭菌ATCC13124

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